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技術(shù)文章

吞噬細(xì)胞功能檢測

點擊次數(shù):15099   發(fā)布時間:2013/4/23 13:47:13

1. 實驗準(zhǔn)備:用無菌注射器吸取3%硫代乙醇酸鈉3ml,注射于小鼠腹腔內(nèi)。

2. 四日后,注射1%羊紅細(xì)胞懸液1ml 于小鼠腹腔內(nèi)。

3. 注射小時后,將小鼠用頸椎脫臼法處死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,用鑷子輕輕夾起腹膜,將腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml 預(yù)溫的PBS,同時用手反復(fù)揉搓腹腔約1分鐘,以便盡可能多地沖洗出小鼠腹腔的吞噬細(xì)胞。

4. 用尖吸管吸取腹腔液,置入潔凈試管內(nèi)。

5. 用尖吸管將腹腔液吹打均勻盡量避免產(chǎn)生氣泡,吸取一滴滴于載玻片上,加蓋玻片鏡檢。

6. 觀察結(jié)果,也可以將腹腔液涂片,平放于濕盤內(nèi),37,孵育30 分鐘。取出涂片,用預(yù)溫的PBS 沖洗次,然后用甲醇固定分鐘,以瑞氏染液份加pH6.4 PBS 2 份混勻后,滴于涂片上染色5-10 分鐘,以蒸餾水沖洗(切勿先將染液傾去)后,待干,鏡檢。

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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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