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點(diǎn)擊次數(shù):15343 發(fā)布時(shí)間:2014/4/17 10:59:55
抗體的功能抗體的主要功能是與抗原(包括外來的和自身的)相結(jié)合,從而有效地清除侵入機(jī)體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物,抗體(antibody)是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以使抗原失活,也可能無效但有時(shí)也會(huì)對(duì)機(jī)體造成病理性損害,如抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體等一些自身抗體的產(chǎn)生,對(duì)人體可造成危害
標(biāo)記抗體技術(shù)
免疫標(biāo)記技術(shù)是將一些既易測定又具有高度敏感性的物質(zhì)標(biāo)記到特異性抗原或抗體分子上,通過這些標(biāo)記物的增強(qiáng)放大效應(yīng)來顯示反應(yīng)系統(tǒng)中抗原或抗體的性質(zhì)與含量。常用的標(biāo)記物包括熒光素、酶和放射性核素等,用這3種標(biāo)記物進(jìn)行標(biāo)記的免疫檢測技術(shù)被稱為3大免疫標(biāo)記技術(shù)。目前,使用的免疫標(biāo)記物還有化學(xué)發(fā)光物質(zhì)、鐵蛋白和膠體金等。
一、辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記抗體
a. 辣根過氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP )
HRP廣泛分布于植物界,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個(gè)同功酶組成,分子量為40,000,等電點(diǎn)為pH3~9,酶催化的*適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在pH5左右。酶溶于水和58%以下的硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以O(shè)D403nm /OD275nm的比值RZ(德文Reinheit Zahl)表示酶的純度。HRP的催化反應(yīng)需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染料,通過反應(yīng)可生成有色的氧化型染料(D)。按與抗原結(jié)合后是否出現(xiàn)可見反應(yīng),可將其分為:在介質(zhì)參與下出現(xiàn)可見結(jié)合反應(yīng)的完全抗體,即通常所說的抗體,以及不出現(xiàn)可見反應(yīng),但能阻抑抗原與其相應(yīng)的完全抗體結(jié)合的不完全抗體。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
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