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ELISA試劑盒是否檢測目的抗原鑒別方法

點擊次數(shù)：14915 發(fā)布時間：2015/2/4 10:48:51

鑒別方法： Ⅰ. 利用干擾實驗即可辨別elisa試劑盒是否檢測目的抗原，方法如下：

(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen≈1:2的混合孵育液

(2)37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體

(3)后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物

(4)實驗完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(5)如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實驗即可辨別ELISA試劑盒是否造假，方法如下：

(1)取出購買的試劑盒A的包被板兩條。

(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(3)另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。

(5)實驗完畢后，檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B，即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。

(6)如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo)，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。

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