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技術(shù)文章

ELISA試劑盒的免疫測定

點(diǎn)擊次數(shù):14976   發(fā)布時間:2015/6/3 11:11:31

       在elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA試劑盒屬固相,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。
       以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有*貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。
洗滌: 
       洗滌在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應(yīng)步驟,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA試劑盒就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
 

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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