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牛白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

點(diǎn)擊次數(shù)：14742 發(fā)布時(shí)間：2015/10/26 10:13:01

牛白細(xì)胞介素6elisa試劑盒為我司常見(jiàn)elisa試劑盒，在這金秋十月中，廣受科研人員關(guān)注，多個(gè)院校老師、同學(xué)在線咨詢或來(lái)電咨詢實(shí)驗(yàn)原理及相關(guān)實(shí)驗(yàn)問(wèn)題！為方便客戶更好了解牛白細(xì)胞6ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理，我司將實(shí)驗(yàn)原理與您分享！

實(shí)驗(yàn)原理

牛白細(xì)胞介素6ELISA試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素6（IL-6）含量。應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛白細(xì)胞介素6（IL-6）水平。用純化的牛白細(xì)胞介素6（IL-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素6（IL-6），再與HRP 標(biāo)記的白細(xì)胞介素6（IL-6）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素6（IL-6）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛白細(xì)胞介素6（IL-6）濃度。

注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)*后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書有異，以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

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原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司