本周一，來自山東大學(xué)的陳同學(xué)聯(lián)系到我司業(yè)務(wù)員，想要了解elisa試劑盒標(biāo)本如何保養(yǎng)這一問題，我司業(yè)務(wù)員隨后為陳同學(xué)安排我司技術(shù)人員進行解答。技術(shù)人員說道：收集樣本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定，應(yīng)避免反復(fù)凍融。在ELISA實驗中，標(biāo)本的處理及保養(yǎng)是關(guān)鍵步驟。接下來關(guān)于ELISA試劑盒標(biāo)本的保養(yǎng)秘笈詳細內(nèi)容：

一、保存要求：
   對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本，及時儲存在4℃?zhèn)溆�。對于隔天再檢測的樣本，及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆�，有條件的，-70℃凍存?zhèn)溆谩?

二、常見液體標(biāo)本的處理方法：
   液體類標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
①血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
②尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
③組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

三、標(biāo)本處理注意事項：
（1）.均質(zhì)：
①組織樣本：肉、肝食品類切細，用絞肉機反復(fù)絞碎，混合均勻。
②水產(chǎn)樣本：去除樣品的非食用部分，食用部分切細，用均質(zhì)器均漿；原料表面較臟時,需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
③蛋類：鮮蛋去殼，蛋黃和蛋白充分混勻。
④水果、蔬菜類：先用水洗去泥沙，然后除去表面的水分，取食用部分。

（2）.振蕩提取：
將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中，振蕩，使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部，提取待測組分。
①振蕩方式：振蕩器上進行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
②在組織樣本中加入有機溶劑之間提取時，應(yīng)邊加邊振蕩，防止組織凝結(jié)成團，不利于提取。

（3）.乳化現(xiàn)象：
在用有機溶劑提取過程中，如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象，解決的方法有：
①用細頭輕輕的攪拌，破壞乳化后，再重復(fù)離心。
②再加入適量的提取劑，重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。

（4）.濃縮：
由于凈化過程中引入的溶劑，可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析，需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干，再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式：氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。

請注意：
①在吹干樣本之前，用甲醇清洗針頭，防止雜質(zhì)干擾。
②在吹樣本時，針頭應(yīng)在液面上空，避免與樣本接觸，防止產(chǎn)生交叉污染。
③樣本吹干后應(yīng)立即取下，避免吹的時間過長，影響*終檢測結(jié)果。
④不同的藥物，吹干后樣本的保質(zhì)期不同，提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。

（5）.凈化：
     經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程，我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的*常見的凈化是：液液分配法。

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