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ELISA新手操作實(shí)驗(yàn)之前需要做哪些準(zhǔn)備?

點(diǎn)擊次數(shù)：14847 發(fā)布時(shí)間：2018/3/21 11:02:07

    近些年來，ELISA方法發(fā)展很快，elisa試劑盒有著高特異性、靈敏性等優(yōu)點(diǎn)，接觸ELISA實(shí)驗(yàn)的科研檢測(cè)員也越來越多，那么ELISA新手操作實(shí)驗(yàn)之前需要做哪些準(zhǔn)備？

    ①標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。
    ②備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。
    ③根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量。
    ④按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。
    ⑤ 選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)；若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對(duì)。
    ⑥ ELISA實(shí)驗(yàn)中為了確定*佳信號(hào)和背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測(cè)抗體 (0.25-2μg/ml)在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
    ⑦一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng) 可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
    ⑧若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
    ⑨標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì) 胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說明書中的細(xì)節(jié) ，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。

恒遠(yuǎn)產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1、簡(jiǎn)便快捷：450nm酶標(biāo)儀檢測(cè)，包含Elisa所需全部試劑和詳細(xì)操作說明，全部現(xiàn)貨。
2、品質(zhì)卓越：原料精選知名品牌，經(jīng)嚴(yán)格甄選，保障各批次批間穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
3、權(quán)威認(rèn)可：已有超過380篇SCI文獻(xiàn)引用，兩次登上期刊Nature。
4、品種齊全：提供近200種常用試劑盒，能檢測(cè)人、大鼠、小鼠、猴和牛等多種屬。
5、暢銷全球：出口到歐美市場(chǎng)，受到全球科學(xué)家的關(guān)注。
6、使用廣泛：客戶遍及全國(guó)各地，包括中科院、北京生命科學(xué)研究院、北京大學(xué)、清華大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、華西醫(yī)科大學(xué)、北京師范大學(xué)、華中科技大學(xué)等著名高校及研究機(jī)構(gòu)。

相關(guān)ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備，除了以上說明的之外，上海恒遠(yuǎn)公司建議大家仔細(xì)閱讀說明書，并確定試劑盒在有效期內(nèi)容，按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司