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點(diǎn)擊次數(shù)：14945 發(fā)布時(shí)間：2020/1/7 8:43:12
提取辦法：
1、鹽析
取小牛血清0.5ml+PBS液0.5ml+飽和硫酸銨2.3ml，充分殽雜勻稱，靜置20min，2500r/min 離心10min。
2、透析
取玻璃紙一張，折成袋形，將離心后的上清液倒入袋內(nèi)，用線扎緊上口（過細(xì)要留有清閑），放入有自來水的小燒杯中透析，要不斷震動(dòng)，每隔2min換一次水，換15次。放入試管待用。
3、準(zhǔn)備與電泳
（1）取兩條2.5cm x 8.0cm 的膜條，將膜條無光輝面向下，放入作育皿中的巴比妥緩沖液中沖鋒滲透。
（2）將充分滲透的兩條膜條取出，用干凈濾紙吸去多余的緩沖液，以醋纖膜的光輝面距一端1.5cm處作為點(diǎn)樣線，并用鉛筆在上面編好號(hào)①②。
（3）用兩個(gè)點(diǎn)樣器分別在標(biāo)準(zhǔn)液和測定液中櫵一下，點(diǎn)樣器下端粘上薄層標(biāo)準(zhǔn)液和樣液，然后將點(diǎn)樣器豎直，舉行點(diǎn)樣。
（4）電泳 將點(diǎn)樣后的膜條置于電泳槽架上，組織時(shí)點(diǎn)樣面向下（無光輝面），點(diǎn)樣端置于陰極，膜條與濾紙貼緊，待平衡5min后，即可通電。調(diào)治電泳儀，使南北極間距的電壓為15v/cm，電流0.4~0.6Ma/cm膜條，通電50分鐘封閉電源。
（5)通電結(jié)束后，用鑷子取出膜條，直接浸于盛有氨基10B的染色 液中，染2min取出，立刻浸于漂洗液中，分別在漂洗液中各漂洗5min，直至布景漂凈為止。用干濾紙吸干薄膜。
（6）觀察兩張薄膜的色彩。
儲(chǔ)存辦法：
每10克加100毫升水進(jìn)行溶解，或用 PBS溶解也可，視用處而決議。然后分裝成小支。若不運(yùn)用防腐劑可儲(chǔ)存在零下20或30攝氏度的恒溫柜中，若運(yùn)用防腐劑則可儲(chǔ)存在零上4攝氏度的環(huán)境下。
原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
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