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恒遠(yuǎn)為您總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)失敗的原因

點(diǎn)擊次數(shù)：14735 發(fā)布時(shí)間：2021/2/3 9:45:49

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)也同樣如此，成功的實(shí)驗(yàn)是個(gè)循序漸進(jìn)的過程，影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有很多，只有的掌握了實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)，才能購(gòu)做出完美的實(shí)驗(yàn)。您可知您的ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)為什么會(huì)失�。刻煳恼碌膬�(nèi)容中，小編將為您找找其中的原因。

第yi、標(biāo)本的影響

溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素），在洗滌過程中往往難以完全洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，產(chǎn)生假陽性。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。

第二、標(biāo)本受細(xì)菌污染

因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。

第三、標(biāo)本保存不當(dāng)

在冰箱中保存過久的標(biāo)本，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、造成假陽性；為克服上述干擾，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測(cè)定，5d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4

℃，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔，不可強(qiáng)烈振蕩。

第四、標(biāo)本凝固不全

在工作中，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè)，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊，易造成假陽性結(jié)果；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司