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ELISA實驗中不同樣本的處理方法你知道嗎

點擊次數(shù)：14677 發(fā)布時間：2021/3/17 11:01:14

近日，武漢大學位大新生在我司購買了elisa試劑盒，并在電話中咨詢了ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求。為了讓更多的人了解，我司特在此為您做出如下分析：

關于血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。在血漿上，應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）去除顆粒。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。尿液則用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

細胞培養(yǎng)上清

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

組織標本

切割標本后，稱取重量。加入定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后份待檢測，其余冷凍備用。

注意：標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.。不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物技術發(fā)展有限公司