對(duì)于很多實(shí)驗(yàn)新手來(lái)說(shuō)，給elisa試劑盒加樣往往都是很頭疼的問(wèn)題。今天，上海恒遠(yuǎn)就來(lái)為大家詳細(xì)介紹下ELISA試劑盒加樣的方法，各位實(shí)驗(yàn)新手拿走不謝哦！
    
       具體方法如下：
一、血清血漿
     加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本，稀釋量大時(shí)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。
1. 血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液。
2. 血漿標(biāo)本，推薦用EDTA的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè)，標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝，凍存于－20℃，避免反復(fù)凍融。
3. 血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑。
4. 標(biāo)本應(yīng)清澈透明，檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過(guò)離心去除。
5. 請(qǐng)勿使用溶血，高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè)，否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。

    二、組織勻漿液的樣本
    要制備過(guò)程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑，防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解，造成檢測(cè)結(jié)果的值偏低。
    因組織勻漿液的樣本蛋白種類多，含量豐富，實(shí)驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行，否則就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體是加入50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本，需稀釋時(shí)，請(qǐng)將樣本與樣本分析緩沖液等量加入，不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。因?yàn)槟繕?biāo)蛋白不同，可能造成降解的蛋白類型可能不一樣，如果實(shí)驗(yàn)前通過(guò)文獻(xiàn)確定用哪種蛋白酶抑制劑，有針對(duì)性加入，可節(jié)省抑制劑。如果查不到相關(guān)文獻(xiàn)，可采用組合抑制的辦法確保蛋白不易被降解。
    
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