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LB培養(yǎng)基中抗生素的貯液配置和工作液濃度

閱讀次數(shù)：4510 發(fā)布時(shí)間：2014/2/19 8:58:43

LB培養(yǎng)基是分子生物學(xué)中*常用的一種培養(yǎng)基，用于細(xì)菌培養(yǎng)。本公司所生產(chǎn)的LB培養(yǎng)基原料，NaCl為國產(chǎn)分析純，胰化蛋白胨及酵母粉為進(jìn)口OXOID。經(jīng)充分混勻所得。

①以水為溶劑的抗生素貯存液應(yīng)用0.22 μm濾器過濾除菌；
②用乙醇溶解的抗生素溶液無須過濾除菌；
③所有抗生素貯液都應(yīng)放于不透光的容器中保存。

注意：鎂離子是四環(huán)素的拮抗劑。對(duì)于以四環(huán)素為篩選抗性的細(xì)菌，應(yīng)使用不含鎂離子的培養(yǎng)基，如LB培養(yǎng)基。

下面是常用抗生素的貯液濃度及工作濃度

氨芐青霉素：貯液濃度   50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作濃度 20 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 60 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）
羧芐青霉素：貯液濃度   50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作濃度 20 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 60 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）
氯霉素：貯液濃度   34 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存工作濃度 25 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 170 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）
卡那霉素：貯液濃度   10 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作濃度 10 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 50 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）
鏈霉素：貯液濃度   50 mg/ml 溶于水 -20℃保存工作濃度 10 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 50 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）
四環(huán)素：貯液濃度   5 mg/ml 溶于乙醇 -20℃保存工作濃度 10 μg/ml （嚴(yán)緊型質(zhì)粒） 50 μg/ml （松弛型質(zhì)粒）

質(zhì)粒類型：

DNA construct	Origin of Replication	Copy number	Classification
Plasmids
pUC vectors	pMB1*	500–700	high copy
pBluescript? vectors	ColE1	300–500	high copy
pGEM? vectors	pMB1*	300–400	high copy
pTZ vectors	pMB1*	>1000	high copy
pBR322 ａnd derivatives	pMB1*	15–20	low copy
pACYC ａnd derivatives	p15A	10–12	low copy
pSC101 ａnd derivatives	pSC101	~5	very low copy
Cosmids
SuperCos	pMB1*	10-20	low copy
pWE15	ColE1	10-20	low copy