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白介素1β抗體

白介素1β抗體

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發(fā)布時(shí)間:2018/7/6 9:38:44

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濃 度: 1mg/1ml
抗體來(lái)源(宿主):兔源、鼠源、其他
克 隆:?jiǎn)慰寺】贵w、多克隆抗體
抗 體 類(lèi) 型:一抗
性 狀: 凍干粉或液體
We offers a wide range of antibodies to cytokines, adhesion molecules, proteases, neurotrophic factors, stem cell factors, signal transduction molecules and developmental proteins. Monoclonal and polyclonal antibodies are available, labeled or unlabeled. The majority of polyclonal antibodies are supplied as antigen affinity-purified IgG preparations. The range of over 8,000 antibody products is available for a variety of animal species:
human
mouse
rat
bovine
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抗體、國(guó)產(chǎn)抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體、一抗、二抗;免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體

單克隆抗體的制備過(guò)程:
1)免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動(dòng)物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備,也可采用脾內(nèi)直接免疫法。
2)骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前,骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過(guò)含8-AG的培養(yǎng)基篩選,防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性(恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活)。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),融合前24h換液一次,使骨髓瘤細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。
3)細(xì)胞融合的關(guān)鍵:   1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如,供者淋巴細(xì)胞沒(méi)有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。
2融合試驗(yàn)的失敗原因是污染,融合成功的關(guān)鍵是提供一個(gè)干凈的環(huán)境,以及適宜的無(wú)菌操作技術(shù)。
4)陽(yáng)性克隆的篩選 應(yīng)盡早進(jìn)行。通常在融合后10天作次檢測(cè),過(guò)早容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。檢測(cè)方法應(yīng)靈敏、準(zhǔn)確、而且簡(jiǎn)便快速。具體應(yīng)用的方法應(yīng)根據(jù)抗原的性質(zhì),以及所需單克隆抗體的功能進(jìn)行選擇。常用的方法有 RIA法、 ELISA法和免疫熒光法等。其中ELISA法*簡(jiǎn)便,RIA法*準(zhǔn)確。陽(yáng)性克隆的篩選應(yīng)進(jìn)行多次,均陽(yáng)性時(shí)才確定為陽(yáng)性克隆進(jìn)行擴(kuò)增。
5)克隆化 克隆化的目的是為了獲得單一細(xì)胞系的群體。克隆化應(yīng)盡早進(jìn)行并反復(fù)篩選。這是因?yàn)槌跗诘碾s交瘤細(xì)胞是不穩(wěn)定的,有丟失染色體的傾向。反復(fù)克隆化后可獲得穩(wěn)定的雜交瘤細(xì)胞株。
動(dòng)物免疫
細(xì)胞融合
克隆篩選
交雜瘤細(xì)胞的克隆化
腹水制備與單抗純化

生物活性:

(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類(lèi)別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上?捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
(7)通過(guò)與細(xì)胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng)
①調(diào)理作用
  IgG、IgM的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合,增強(qiáng)其吞噬能力,通常將抗體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。
②發(fā)揮抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用


抗體的多樣性:
任何一個(gè)正常人血清中的抗體都是含有成千上萬(wàn)的、多種多樣的、具有各種獨(dú)特型抗原性的免疫球蛋白分子混合物。κ鏈和 λ鏈可以和各類(lèi)、各亞類(lèi)配合。重鏈、輕鏈本身又有各種異型,每一克隆產(chǎn)生的Ig又具有自身的獨(dú)特型。
抗體的多樣性受 B細(xì)胞系統(tǒng)的遺傳基因控制。肽鏈?zhǔn)怯蓛蓚(gè)不同基因分別編碼可變區(qū)或恒定區(qū),恒定區(qū)的基因(C基因)是有限的,它雖然可以決定Ig分子的類(lèi)別和亞類(lèi),為造成Ig分子多樣性的原因,但是,造成免疫球蛋白分子多樣性的主要原因卻在于可變區(qū)的異質(zhì)性,可變區(qū)是由V基因編碼的,而V基因的數(shù)目仍不清楚。
對(duì)抗體多樣性的遺傳控制曾提出3種學(xué)說(shuō):①種系學(xué)說(shuō)(又稱胚系學(xué)說(shuō)):抗體形成細(xì)胞具有編碼Ig分子的全部基因(即有限數(shù)量的C基因和未知數(shù)量的V基因,它是通過(guò)長(zhǎng)期進(jìn)化形成并通過(guò)生殖細(xì)胞從親代傳給子代。又稱胚系學(xué)說(shuō);②體細(xì)胞突變學(xué)說(shuō):在生殖細(xì)胞內(nèi)只繼承了數(shù)量有限的V基因,Ig分子多樣性的形成,是由于體細(xì)胞在發(fā)育過(guò)程中發(fā)生突變或基因重組,從而產(chǎn)生許多不同的 V基因。體細(xì)胞突變可能對(duì)Ig分子的多樣性發(fā)生重要作用;③V區(qū)基因相互作用學(xué)說(shuō):Ig分子可變區(qū)是由V基因片段、J基因片段和D基因片段組成,V、D、J基因相互連接對(duì)Ig分子多樣性的產(chǎn)生,是極為重要的。Ig的多樣性不可能簡(jiǎn)單地歸因于上述的某一學(xué)說(shuō),它可能與上述多種機(jī)制有關(guān),也可能還與基因片段連接點(diǎn)上的連接多樣性以及VL和VH鏈的不同配對(duì)有關(guān)。

更新時(shí)間:2024/11/18 9:49:20

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